| d、活動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測(cè)器相適應(yīng)。如使用UV檢測(cè)器，好使用對(duì)紫外吸收較低的溶劑配制。 e、活動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低，否則輕易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無(wú)法進(jìn)行。 f、在活動(dòng)相配制好后，一定要進(jìn)行脫氣。除往溶解在活動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測(cè)，還可以防止活動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。 3、活動(dòng)相流速的選擇： 因柱效是柱中活動(dòng)相線性流速的函數(shù)，使用不同的流速可得到不同的柱效。對(duì)于一根特定的色譜柱，要追求佳柱效，好使用佳流速。對(duì)內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱，流速一般選擇1ml／min，對(duì)于內(nèi)徑為4.0mm柱，流速0.8ml／min為佳。 當(dāng)選用佳流速時(shí)，分析時(shí)間可能延長(zhǎng)。可采用改變活動(dòng)相的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間(如使用反相柱時(shí)，可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量)。 留意： a．由于甲醇廉價(jià)，對(duì)于反相柱推薦使用甲醇體系(必須使用乙腈的場(chǎng)合除外)。 b．對(duì)于正相柱推薦使用沸程為30-60℃的石油醚或提純后的己烷作活動(dòng)相，沒(méi)有提純的己烷不得使用。用水好使用超純水(電阻率大于18兆歐)，往離子水及雙蒸水中含有酚類(lèi)雜質(zhì)，有可能影響分析結(jié)果。 c．含水活動(dòng)相奸在實(shí)驗(yàn)前配制，尤其是夏天使用緩沖溶液作為活動(dòng)相不要過(guò)夜。好加進(jìn)*，防止細(xì)菌生長(zhǎng)。 d．活動(dòng)相要求使用0.45 μm濾膜過(guò)濾，除往微粒雜質(zhì)。 e．使用HPLC級(jí)溶劑配制活動(dòng)相，使用合適的活動(dòng)相可延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命，進(jìn)步柱性能。 4、柱性能測(cè)試： 啟動(dòng)液相色譜儀： a、活動(dòng)相流速設(shè)定為1ml／min。 b、UV檢測(cè)器波長(zhǎng)設(shè)定為254nm。 使用出廠測(cè)試時(shí)使用的活動(dòng)相組成及測(cè)試樣品。 記錄并計(jì)算測(cè)試結(jié)果。 *參考(標(biāo)準(zhǔn)JB5226-91)液相色譜儀測(cè)試用標(biāo)準(zhǔn)色譜柱。 | |
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