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分光光度計(jì)就是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器，它是一種使用率很高的實(shí)驗(yàn)室儀器。常用于核算、蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。在印染方面，我們可以用分光光度計(jì)測(cè)量染色時(shí)燃料的上染百分率，以及整理在織的衣物上助劑的濃度，還可以用于顏色的測(cè)量。同時(shí)它還廣泛的應(yīng)用于食品檢測(cè)、農(nóng)藥的檢測(cè)以及工業(yè)上石油的檢測(cè)等，紫外可見(jiàn)光光分度在實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用非常廣泛。
分光光度計(jì)的組成
各種型號(hào)的可見(jiàn)分光光度計(jì)，就其基本結(jié)構(gòu)來(lái)說(shuō)，都是由五個(gè)部分組成的，即光源、單色器、洗手池、檢測(cè)器以及信號(hào)指示系統(tǒng)。如圖所示：
光源→單色器→吸收池→檢測(cè)器→信號(hào)顯示系統(tǒng)
分光光度計(jì)的基本原理
基于物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光的選擇性吸收，不同的物質(zhì)都有各自的吸收光譜，當(dāng)光經(jīng)色散后的光譜通過(guò)某一溶液時(shí)，其中某些波長(zhǎng)的光就會(huì)被溶液吸收。根據(jù)朗伯-比爾定律，當(dāng)一束平行單色光照射到一定濃度的均勻溶液時(shí)，光強(qiáng)的減小程度和入射光的強(qiáng)度，溶液的濃度以及所透過(guò)溶液的長(zhǎng)度成正比，其公式為：T=I/I0 A=LogI0/I=Kbc
其中：T:透色比 I0：入射光強(qiáng) A：吸光度 I：頭色光強(qiáng)度 K：吸收系數(shù)，1/mol/com b：液層厚,cm C：溶液的濃度,mol/l
光的吸收定律的使用范圍
光的吸收定律不僅適用于有色溶液，也適用于無(wú)色溶液及氣體和固體的非散射均勻體系，不僅適用于可見(jiàn)光的單色光，也適用于紫外和紅外光區(qū)的單色光，但應(yīng)注意，此定律僅適用于單色光和一定范圍的低濃度溶液。溶液濃度過(guò)大時(shí)，透光性質(zhì)發(fā)生變化，從容使溶液對(duì)光的吸收度與溶液濃度不成正比關(guān)系，波長(zhǎng)交寬的混合光影響光的互補(bǔ)吸收，也會(huì)使測(cè)定產(chǎn)生誤差。
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